嶋田 透

We previously reported that the FP25K gene (fp25K) product of the baculovirus Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV) is involved in postmortem host degradation. Here, we investigated the mechanism by which reduced postmortem host degradation is caused after the infection of fp25K-mutated BmNPVs. Firstly, we investigated gene expression levels of vcath and chiA both of which products are involved in postmortem host degradation. We found that transcriptional levels of these genes in fp25K-mutated BmNPV-infected BmN cells were comparable to those in cells infected with wild-type (wt) BmNPV. Next, we examined the cysteine protease activity in fp25K-mutated BmNPV-infected BmN cells. Although the cysteine protease activity in BmN cells infected with fp25K-mutated BmNPVs was comparable to that of wt BmNPV-infected cells, the released activity in the culture medium is dramatically reduced in that of cells infected with fp25K mutants. We also found that the cysteine protease activity in the hemolymph off p25K-mutated BmNPV-infected B. mori larvae is drastically reduced compared to that of wt BmNPV-infected larvae. These results show that the release of cysteine protease into the hemolymph of B. mori larvae infected with fp25K-mutated BmNPVs is reduced and, as a consequence, postmortem host degradation of infected insects is lessened.

これまでにW染色体上にはW-Kabuki, W-KamikazeならびにW-Samuraiと称する3種類のRAPDが得られている。これらのうちW-Kabuki RAPDについては, その配列を含むBACクローンが得られており, そこを起点にcontigが進んでいる。W染色体の解析をさらに進めるためには, 起点となるDNAマーカーを増やす必要がある。そこで本研究では, まず, 新たに合成した500種類の10-merの任意配列プライマーを用い, W染色体上のRAPDの探索を行った。その結果, 1種類のW染色体特異的RAPDが得られた。またW染色体には多くのレトロトランスポゾンが入れ子状態で存在することから, 各種レトロトランスポゾンの配列を含むPCR用プライマーを作製し, 新たなマーカーの探索を行った。その結果, レトロトランスポゾンKabukiとBMC1の配列を含むプライマーの組み合わせにより, 新たなDNAマーカーが得られた。なお, これら2種類のW染色体特異的DNAマーカーは, 限性ゼブラのW染色体上にも存在していたが, 雌決定遺伝子が欠落したW染色体上には存在していなかった。これらのことから, 2種類のDNAマーカーは, 雌決定遺伝子に比較的近い位置に存在するものと考えられた。